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博精:想要了解熒光分光光度計(jì)就要知道這些參數(shù)

日期: 23-02-08 14:57 瀏覽次數(shù) :8

想要了解熒光分光光度計(jì)就要知道這些參數(shù),檢測(cè)熒光的儀器:分子熒光光譜儀又稱(chēng)熒光分光光度計(jì)有的場(chǎng)合也叫熒光光譜儀,是一種定性、定量分析的儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。

熒光光度法是基態(tài)原子吸收光源的能量而變成激發(fā)態(tài),激發(fā)態(tài)原子在去活化過(guò)程中將吸收的能量以熒光的形式釋放出來(lái),此熒光信號(hào)的強(qiáng)弱與樣品中待測(cè)元素的含量成線(xiàn)性關(guān)系,因此通過(guò)測(cè)量熒光強(qiáng)度就可以確定樣品中被測(cè)元素的含量。

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  熒光分光光度計(jì)在性能比較時(shí)應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):

  靈敏度:熒光分光光度計(jì)的靈敏度是使用者最在乎的一個(gè)指標(biāo)。靈敏度表明如何獲得噪聲小且數(shù)據(jù)平滑的指標(biāo),該指標(biāo)越大,系統(tǒng)越好。它也被稱(chēng)為信噪比。但是靈敏度的測(cè)量條件不同,這個(gè)指標(biāo)的數(shù)字也不同。若測(cè)量條件不一致,如狹縫、響應(yīng)(時(shí)間常量)等,則無(wú)法進(jìn)行不同系統(tǒng)的比較。

  光源:除個(gè)別案例外,CMF-300 熒光分光光度計(jì)一般使用150W氙燈作為光源。無(wú)臭氧燈在波長(zhǎng)小于220 nm處提供很弱的光,若使用小于220 nm的波長(zhǎng)作為激發(fā)光則是不可能的。

  波長(zhǎng)范圍:熒光分光光度計(jì)的測(cè)量波長(zhǎng)越寬,應(yīng)用越廣。

  狹縫:也稱(chēng)為帶寬,它代表在光度計(jì)入口和出口處狹縫的寬度。如果狹縫寬度大,則由于光量增加而可以獲得具有相對(duì)較低噪聲(靈敏度高)的數(shù)據(jù),但是,無(wú)法確定光譜的細(xì)微峰值。如果狹縫很窄,則可以確定光譜的細(xì)微峰值,但是光量會(huì)減少,從而導(dǎo)致數(shù)據(jù)噪聲增加。雖然最終結(jié)果主要取決于樣品,但是考慮到CMF-300 熒光分光光度計(jì)對(duì)微量樣品分析的靈敏度,沒(méi)必要縮小狹縫寬度。

  響應(yīng):如果響應(yīng)較大,光譜就變得比較平滑,但是光譜形狀會(huì)變鈍。當(dāng)測(cè)量激發(fā)、發(fā)射光譜時(shí),應(yīng)該依據(jù)掃描速度選擇最佳的響應(yīng)。在一定掃描速度下,如果沒(méi)有選擇合適的響應(yīng),即使響應(yīng)比較小,也有可能增加噪聲,使光譜變形。

  其他:如三維光譜測(cè)量,磷光測(cè)量等特殊的測(cè)量,可以通過(guò)選配軟件來(lái)實(shí)現(xiàn)。一些儀器型號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)配置也可執(zhí)行這些測(cè)量。


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